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你了解乳酸乳球菌NZ900的含义吗?

作者:365bet网上手机投注      发布日期:2019-08-04   点击:

通过重组表达方法获得具有免疫原性和活性的NZ9000重组乳杆菌。
根据pNZ8148乳酸菌表达载体序列的多克隆位点,根据GenBank,Primer 5软件设计了一对用于扩增BSH酶编码区序列的特异性引物。(EU 4777374);通过PCR扩增L.
将植物乳杆菌-UVS29的BSH基因插入乳酸菌表达载体pNZ8148中以构建重组表达载体pNZ8148-BSH。
将该载体电转化到乳酸乳球菌乳酸乳球菌NZ 9000细胞中。
加入诱导物(Nysin)以诱导靶基因的表达。通过电洗脱纯化表达的蛋白质。通过SDS-PAGE分析表达的蛋白质,并通过蛋白质印迹鉴定BSH的免疫原性。
最后,根据BSH的物理和化学性质确定其活性。
本研究克隆了L.
植物乳杆菌1-UVS29 BSH基因已成功构建了携带BSH基因的重组原核表达质粒pNZ8148-BSH。
在乳酸乳球菌NZ 9000中电穿孔pNZ8148-BSH并用DNAStar软件分析后,发现该基因编码的氨基酸序列与已知序列100%同源,乳酸乳球菌的原核表达系统是它是获得的。pNZ8148-稳定表达BSH。
当乳酸链球菌素在30℃诱导3小时时,BSH在乳酸乳球菌NZ 9000中高度表达。
电洗脱纯化后,蛋白质的纯度高达90%。
SDS-PAGE显示在约37kDa的相对分子量下观察到靶蛋白表达条带,这与预期结果一致。
Western blot鉴定结果表明,该表达产物与多克隆抗体植物乳杆菌特异性反应,具有良好的免疫原性。
根据BSH的物理化学性质确定表达的蛋白质的活性为0。
77μmol。
Min-1为未来研究转基因BSH乳酸菌和微生物食品及降胆固醇制剂的研发奠定了基础。
可能在中国不可用
你有号码吗?
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对不起,我不知道这个。
热心的朋友们
2013-04-2916:42




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